細(xì)胞計(jì)數(shù)的方法和原理主要是哪些呢？

　　細(xì)胞計(jì)數(shù)是細(xì)胞實(shí)驗(yàn)中非常重要的一個(gè)環(huán)節(jié)，科研工作者需要從多方面對(duì)培養(yǎng)的細(xì)胞進(jìn)行分析，比如活細(xì)胞數(shù)、死細(xì)胞數(shù)、細(xì)胞存活率等。經(jīng)典的通過(guò)臺(tái)盼藍(lán)染色方法對(duì)細(xì)胞進(jìn)行人工計(jì)數(shù)，是我們研究細(xì)胞常備技能之一。隨著科技發(fā)展，自動(dòng)化的細(xì)胞計(jì)數(shù)儀應(yīng)運(yùn)而生，它以便捷、快速等優(yōu)勢(shì)被廣泛應(yīng)用到細(xì)胞實(shí)驗(yàn)中。
　　細(xì)胞計(jì)數(shù)的方法和原理主要是哪些呢？
　　1.手工顯微鏡法
　　又稱血球計(jì)數(shù)板法，是原始的細(xì)胞計(jì)數(shù)方法，顯微鏡下調(diào)整不同放大倍數(shù)的物鏡，通過(guò)染色的方法人工觀察細(xì)胞狀態(tài)判斷細(xì)胞死活，進(jìn)行計(jì)數(shù)。通過(guò)檢測(cè)出一定體積的均勻細(xì)胞懸液中的細(xì)胞個(gè)數(shù)（對(duì)一定數(shù)量的小格或中格計(jì)數(shù)，根據(jù)相應(yīng)的小/中格所占的體積，可以推算出單位體積的溶液中微生物細(xì)胞的密度或總數(shù)），換算出每毫升的細(xì)胞個(gè)數(shù)，從而得到細(xì)胞懸液的細(xì)胞濃度。實(shí)驗(yàn)過(guò)程中采用五點(diǎn)取樣法，即一般隨計(jì)數(shù)室四角上的四個(gè)中方格以及正中間的一個(gè)中方格進(jìn)行統(tǒng)計(jì)（對(duì)于壓線的，采取數(shù)上不數(shù)下，數(shù)左不數(shù)右的原則）。這種方法數(shù)細(xì)胞的原則是只數(shù)完整的細(xì)胞，若細(xì)胞聚集成團(tuán)時(shí)，按照1個(gè)細(xì)胞計(jì)算。
　　2.庫(kù)爾特原理又稱電阻抗檢測(cè)原理。細(xì)胞是相對(duì)不良導(dǎo)體，當(dāng)細(xì)胞懸浮電解質(zhì)中，將小孔管插入細(xì)胞懸液，使其管內(nèi)充滿稀釋液，位于小孔管兩側(cè)電極產(chǎn)生穩(wěn)定電流。當(dāng)一個(gè)細(xì)胞通過(guò)小孔時(shí)，瞬間引起電壓變化出現(xiàn)一個(gè)脈沖信號(hào)，細(xì)胞體積越大，引起脈沖越大，產(chǎn)生脈沖振幅越高，脈沖信號(hào)由下列步驟完成：①放大；②閾值調(diào)節(jié)；③甄別；④計(jì)數(shù)。采用這種計(jì)數(shù)原理的儀器具代表性的是CASY細(xì)胞計(jì)數(shù)儀，這種原理的儀器內(nèi)置液路系統(tǒng)，需要定期清洗管路防止堵塞。